一种转基因水稻mfb‑MH3301品系特异性实时荧光定量PCR检测引物、检测方法,特异性引物对为:MH3301‑3‑qF,其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1所示;MH3301‑3‑qR,其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.2所示,特异性探针为:MH3301‑3‑P,其序列如序列表SEQ ID No.3。采用本发明的引物对与探针进行实时荧光定量PCR反应,可以鉴定样品中是否含有mbf‑MH3301品系,并能对其含量进行准确定量。
一种抗虫转基因水稻mfb‑MH3301品系特异性定性PCR检测引物、检测方法,属于生物技术领域。所述检测引物对为:MH3301‑3‑aF,其核苷酸序列如序列SEQ ID No.1所示;所述反向引物为MH3301‑3‑aR,其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.2所示。所述检测方法及检测试剂盒可作为鉴定转基因水稻mfb‑MH3301及其衍生衍生品种的有效手段。
一种转基因水稻mfb‑MH3301外源基因纯合/杂合状态的检测方法。所述引物的核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1、SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。本发明还公开了其检测方法和检测试剂盒,本发明检测方法能够准确检测出转基因水稻mfb‑MH3301外源基因插入的纯合/杂合状态,能够用于转基因水稻mfb‑MH3301遗传育种、样品鉴定及定量检测标准物质研制等方面
本发明在专利CN103667476A的基础上公开了转基因水稻mfb‑MH3301的外源插入片段全序列及其旁侧序列。扩增的方法获得外源插入片段和水稻序列连接区的3’端旁侧序列,其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示;本发明进一步公开了外源插入片段全序列,其核苷酸为SEQ ID No.2所示;本发明提供的分子特征为转基因水稻mfb‑MH3301
本发明提供了一种转Cry1Ab抗虫基因水稻品系mfb-MH3301的检测方法,属于生物技术领域。所述方法是转化体mfb-MH3301中外源基因Cry1Ab及其表达框在水稻染色体上插入片段及其旁侧特异序列SEQ ID NO:1及基于该序列建立的特异性PCR扩增鉴定技术。该PCR方法可作为鉴定转基因水稻品系mfb-MH3301及该品系的衍生系的有效手段。
该方法是将大豆Gly m Bd 30K基因RNA干扰表达载体pCAMBIA3301-30K-RNAi通过农杆菌介导的方法导入大豆;所述的大豆Gly m Bd 30K基因RNA干扰表达载体pCAMBIA3301-30K-RNAi是将序列为SEQ ID NO.2的Gly m Bd 30K基因的发卡结构插入到载体pCAMBIA3301的PmI I和BstEII位点得到。